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近日，復(fù)旦大學(xué)附屬兒科醫(yī)院肝病科研究團隊發(fā)現(xiàn)并報道了一種新的遺傳性肝病，這一成果由復(fù)旦大學(xué)附屬兒科醫(yī)院、復(fù)旦大學(xué)附屬金山醫(yī)院、中國科學(xué)院深圳先進技術(shù)研究院、復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院、上海交通大學(xué)附屬仁濟醫(yī)院、復(fù)旦大學(xué)生物醫(yī)學(xué)研究院及奧地利格拉茨大學(xué)醫(yī)學(xué)院病理系多家單位合作完成，并于7月31日在線刊登于BMJ旗下的全球知名遺傳病雜志Journal of Medical Genetics。該研究揭示了一種新的遺傳性肝病，致病基因為ZFYVE19，臨床表現(xiàn)為先天性肝纖維化、硬化性膽管炎和高GGT膽汁淤積癥。
圖1：論文ZFYVE19缺陷相關(guān)先天性肝纖維化、硬化性膽管炎和高GGT膽汁淤積癥由BMJ旗下的Journal of Medical Genetics再線發(fā)表
 圖2：部分上海研究團隊成員：左側(cè)，從前往后依次為欒維莎博士后（共同第一作者）、郝陳指博士（共同第一作者）、陸怡醫(yī)生、謝新寶博士、庫爾班江博士、李忠蝶碩士生、丘倚靈博士后、盧仕琪碩士、王建設(shè)醫(yī)生（通信作者）；右側(cè)上，肝病科病理顧問Alexander Knisely教授；右側(cè)下，黎佳琪碩士（共同第一作者）。
隨著經(jīng)濟社會的日益發(fā)展，兒童肝病的疾病譜在數(shù)十年間發(fā)生了巨大轉(zhuǎn)變，由原來以傳染性肝炎為主，逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)橐赃z傳性肝病等罕見病為主。作為國內(nèi)最大的兒童肝病診治和研究中心，我院肝病科在多年的臨床工作中積累了豐富的經(jīng)驗，并在立足于臨床病人的科研中收獲了諸多成果。2017年王建設(shè)教授領(lǐng)銜的肝病團隊鑒定了MYO5B缺陷引起的低GGT膽汁淤積癥譜系，被國際上公認為家族性膽汁淤積癥6型（圖3）。今年3月，該團隊又在國際上率先報道了一組由USP53缺陷引起低GGT膽汁淤積癥譜系，詳細闡述了該病的臨床特征及病理特征，并揭示了這一新基因與已知低GGT膽汁淤積癥致病基因TJP2的潛在關(guān)聯(lián)（圖4）。而近期報道的ZFYVE19則是全球首次關(guān)于該基因致病的報道，臨床上表現(xiàn)為先天性肝纖維化、硬化性膽管炎和高GGT膽汁淤積癥。
 圖3： MYO5B缺陷導(dǎo)致低GGT膽汁淤積癥疾病譜系，發(fā)表于2017年Hepatology
圖4：USP53缺陷導(dǎo)致低GGT肝內(nèi)膽汁淤積癥的臨床特點、病理特征及超微結(jié)構(gòu)，2020年發(fā)表于Liver International
探索真理的道路從來不是一帆風(fēng)順，創(chuàng)新性越強，研究難度越大，耗時越長。從初次通過二代測序方法從病人中篩選出ZFYVE19，到研究成果被認可并發(fā)表，歷時漫長的6年時間，經(jīng)歷了多位研究團隊成員的接力攻關(guān)。由于既往對于這一基因功能的研究十分有限，初期在國際學(xué)術(shù)會議進行報道時受到了業(yè)內(nèi)學(xué)者的較多質(zhì)疑。為了尋找致病證據(jù)，課題組研究人員積極收集更多病例、隨訪病人，提供具有說服力的家系證據(jù)；與華山醫(yī)院、仁濟醫(yī)院合作，收集病人肝移植術(shù)中的組織樣本進行研究，證明在病人中該蛋白表達缺失（圖5）；與奧地利格拉茨大學(xué)醫(yī)學(xué)院病理系合作，分析研究病人肝組織的病理特征，從病理特征推測此病應(yīng)該是纖毛病（圖6），終于找到進一步深入研究的線索；與中科院深圳先進技術(shù)研究院合作，通過細胞系模型和病人來源的誘導(dǎo)干細胞實驗證實ZFYVE19變異影響纖毛形成，首次明確該基因與纖毛形成的直接相關(guān)性（圖7）；與復(fù)旦大學(xué)生物醫(yī)學(xué)研究院合作，發(fā)現(xiàn)ZFYVE19基因的數(shù)據(jù)庫注釋存在缺陷，從而導(dǎo)致這一基因在測序分析中容易被忽略，作者通過該基因轉(zhuǎn)錄和蛋白翻譯方面進行深入研究，對該基因的翻譯起始位點進行了新的注釋，故而至今才被學(xué)術(shù)界揭示，克服了注釋錯誤對研究造成了多重壁壘（圖8）。在多方協(xié)助、共同努力下，課題組克服重重困難，歷時多年的研究成果終得以獲得業(yè)內(nèi)專家認可，也代表復(fù)旦大學(xué)附屬兒科醫(yī)院肝病科的專業(yè)研究水平登上了一個新的高峰。
圖5：ZFYVE19缺陷病人家系圖顯示符合常染色體隱性遺傳，病人肝組織中ZFYVE19蛋白缺失。
圖6：病人肝臟組織病理中纖毛蛋白表達異常，提示纖毛病可能
 圖7：細胞實驗證實，敲低ZFYVE19可以使細胞形成異常數(shù)目和形態(tài)的中心粒及纖毛
圖8：ZFYVE19的mRNA結(jié)構(gòu)重新分析發(fā)現(xiàn)以往數(shù)據(jù)庫中注釋蛋白翻譯起始位點錯誤。sAUG：注釋翻譯起始位點。dAUG：實際翻譯起始位點
該論文由課題組的欒維莎博士后、郝陳指博士和黎佳琪碩士為共同第一作者，王建設(shè)教授為通信作者。在此感謝各位作者、合作者、給予幫助的同道和國家自然科學(xué)基金項目的大力支持，并對參加研究的病人和家屬表示深深的謝意。
豐碩的成果總來源于長期的努力，王建設(shè)教授帶領(lǐng)的臨床和科研團隊，從2003年開始就專注于兒童膽汁淤積癥的臨床和研究，且在國際上較早在病人中應(yīng)用二代測序方法進行已知疾病的診斷和未知疾病的發(fā)掘，在多年臨床和科研工作中積累了豐富的臨床病例和研究數(shù)據(jù)資源。在未來，基于國家兒童醫(yī)學(xué)中心的大平臺，復(fù)旦大學(xué)附屬兒科醫(yī)院兒童肝病中心必將能夠獲得長遠的發(fā)展和進步，服務(wù)于更多疑難肝病患兒，為更多無助的家庭帶來希望和慰藉。
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