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ZFYVE19缺陷病由ZFYVE19基因突變所致，2019年率先由復(fù)旦大學(xué)附屬兒科醫(yī)院王建設(shè)教授領(lǐng)銜的團(tuán)隊鑒定并發(fā)表，之后陸續(xù)得到其他團(tuán)隊證實。該病可導(dǎo)致終末期肝病，許多患者最終需要肝移植才能長期存活。然而肝移植面臨供體的缺乏、肝移植后需要長期服用免疫抑制劑、以及肝移植后可能出現(xiàn)的并發(fā)癥，因此迫切需要尋找新的治療方法。
尋找新的治療方法需要良好的動物模型和對致病機(jī)制的深入了解。為此，王建設(shè)教授團(tuán)隊首次構(gòu)建Zfyve19基因敲除小鼠模型,可以模擬人類疾病表型，進(jìn)一步證明ZFYVE19缺陷病的致病基礎(chǔ)是ZFYVE19基因功能完全喪失，為尋找新的治療方法打下了基礎(chǔ)。
王建設(shè)教授團(tuán)隊利用該動物模型，和華東理工大學(xué)的科學(xué)家合作，首次探討了基因治療ZFYVE19缺陷病的可能性，相關(guān)研究成果最近發(fā)表在知名醫(yī)學(xué)期刊《HUMAN GENE THERAPY》，首次證明腺相關(guān)病毒載體介導(dǎo)的基因治療可以有效改善Zfyve19-/-小鼠模型的肝臟病理及生化指標(biāo)，有望達(dá)到疾病臨床治愈的目標(biāo)。
該團(tuán)隊基于前期對ZFYVE19基因序列的深入研究，首先構(gòu)建了三種基因治療載體（AAV-hZFYVE19：裝載人ZFYVE19基因全長序列；AAV-hZFYVE19-co：裝載經(jīng)優(yōu)化的人ZFYVE19基因全長序列；AAV-hZFYVE19-m：裝載從76位翻譯起始位點起始的miniZFYVE19蛋白編碼序列）。
三種載體經(jīng)細(xì)胞系證明可良好表達(dá)后，以不同劑量注射給ANIT誘導(dǎo)的Zfyve19-/-小鼠模型，以ANIT誘導(dǎo)的Zfyve19-/-小鼠模型和野生型小鼠作為對照，發(fā)現(xiàn)：
1. 低劑量（1×1011 vg/kg和5×1011 vg/kg）的AAV-hZFYVE19和中劑量（5×1012 vg/kg和1×1013 vg/kg）的AAV-hZFYVE19-m載體基因治療可有效減輕Zfyve19-/-小鼠模型肝臟組織學(xué)病變、膽管周圍纖維化程度及血清肝損傷標(biāo)志物水平，且1×1011 vg/kg的AAV-hZFYVE19載體最優(yōu)。
① 肝臟匯管區(qū)的膽管增生、膽管畸形、炎性細(xì)胞浸潤減輕，最優(yōu)劑量下HE染色組織學(xué)改善程度達(dá)到野生型小鼠相同的水平。
② 最優(yōu)劑量下CD68組織化學(xué)顯示巨噬細(xì)胞浸潤改善程度達(dá)到野生型小鼠相同的水平。
③ 最優(yōu)劑量下CK19組織化學(xué)染色顯示膽管增生改善程度達(dá)到野生型小鼠相同的水平。
④ 最優(yōu)劑量下天狼星紅染色顯示纖維化改善程度達(dá)到野生型小鼠相同的水平。
⑤ 最優(yōu)劑量下血清肝膽損傷標(biāo)志物改善程度達(dá)到野生型小鼠相同的水平。
本研究的重要意義在于：
1. 通過基因替補治療，完全糾正了動物模型的肝臟損傷，進(jìn)一步確定ZFYVE19基因突變和ZFYVE19缺陷病肝臟損傷之間的因果關(guān)系；
2. 在動物模型基因治療上使用較低的劑量即可完全糾正ZFYVE19缺陷病表型，為未來ZFYVE19缺陷病的臨床基因治療研究提供了良好的基礎(chǔ)；
3. 與多數(shù)基因缺陷疾病的基因治療有所不同的是，ZFYVE19缺陷病基因治療并不ZFYVE19表達(dá)量越高效果越好，這或許提示ZFYVE19基因表達(dá)缺陷或過量對機(jī)體均可致病，為未來鑒定ZFYVE19基因新變異提供另一思路。
基于本研究良好的治療效果，現(xiàn)在團(tuán)隊已經(jīng)完成了臨床使用級別的ZFYVE19基因治療藥物的生產(chǎn)，開始臨床前的安全性研究。希望早日完成相關(guān)測試，早日能夠讓該基因療法造福病人。
相關(guān)文獻(xiàn)：
1. Yang J, Zhang YN, Wang RX, Hao CZ, Qiu Y, Chi H, Luan WS, Tang H, Zhang XJ, Sun X, Sheps JA, Ling V, Cao M, Wang JS. ZFYVE19 deficiency: a ciliopathy involving failure of cell division, with cell death. J Med Genet. 2024 May 30:jmg-2023-109779. doi: 10.1136/jmg-2023-109779. Online ahead of print. PMID: 38816193.
2. Luan W, Hao CZ, Li JQ, Wei Q, Gong JY, Qiu YL, Lu Y, Shen CH, Xia Q, Xie XB, Zhang MH, Abuduxikuer K, Li ZD, Wang L, Xing QH, Knisely AS, Wang JS. Biallelic loss-of-function ZFYVE19 mutations are associated with congenital hepatic fibrosis, sclerosing cholangiopathy and high-GGT cholestasis. J Med Genet. 2021;58:514–525:jmedgenet-2019-106706. doi: 10.1136/jmedgenet-2019-106706. PMID: 32737136.
3. Zhang Y, Tang D, Wang L, Yang J, Wu X, Xiao X, Wang J. Prevention of portal-tract fibrosis in Zfyve19-/- mouse model with adeno-associated virus vector delivering ZFYVE19. Hum Gene Ther. 2023 Sep 6. doi: 10.1089/hum.2023.041. Online ahead of print.PMID: 37672510.
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